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ELISA檢測試劑盒檢測方法
更新時間:2015-10-07   點擊次數(shù):885次

ELISA檢測試劑盒檢測方法簡述:
1)間接法測抗體:將特異性抗原包被在固相載體上,形成固相抗原,加入待檢標(biāo)本(含相應(yīng)抗體),其中抗體與固相抗原形成抗原-抗體復(fù)合物,再加入酶標(biāo)記的抗體(抗人免疫球蛋白抗體,亦稱二抗),與上述抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合。此時加入底物,復(fù)合物上的酶則催化底物而顯色。

    雙抗體夾心法測抗原:將已知的特異性抗體包被在固相載體上,形成固相抗體,加入待檢標(biāo)本(含相應(yīng)抗原),抗原與固相抗體結(jié)合成復(fù)合物,再加入特異性酶標(biāo)抗體,使之與已形成的抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合,當(dāng)加入與酶相應(yīng)的底物時,酶催化底而顯色,根據(jù)顏色的有無和顏色的深淺對待測抗原進行定性和定量。

    ELISA檢測試劑盒競爭法測抗原:將特異性抗體與固相聯(lián)結(jié),形成固相抗體,加入待測標(biāo)本(含相應(yīng)抗原)和相應(yīng)的一定量的酶標(biāo)抗原,待測標(biāo)本中的抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合,待測標(biāo)本中抗原含量越高,則與固相抗體結(jié)合亦越多,使得酶標(biāo)抗原與固相抗體結(jié)合的機會就越少,甚至沒有機會結(jié)合。加入底物后不顯色或顯色很淺,顯色深者為陰性。

    酶聯(lián)免疫試驗的量反應(yīng)分析:不同的酶聯(lián)免疫方法檢測結(jié)果的OD值均與標(biāo)本中待檢的抗原或抗體的量相關(guān)(間接法和夾心法正相關(guān),競爭法負相關(guān)),因此可以利用OD值對標(biāo)本中的待檢物質(zhì)進行定量分析。

    酶聯(lián)免疫試驗質(zhì)反應(yīng)分析:ELISA檢測試劑盒根據(jù)檢測標(biāo)本OD值,對標(biāo)本中待測物質(zhì)做出有或無的判定(即陽性反應(yīng)或陰性反應(yīng))

 

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